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Protein

MTT assay, treatment and analysis

  • 作為細胞存活率的指標、代表粒線體的活性
  • MTT:
    • 3- (4,5-cimethylthiazol-2-yl)-2,5-diphenyl tetrazolium bromide
    • 在活細胞的粒線體中参與呼吸作用(死細胞不具 SDH，無法進行反應)
  • 應用：
    • 新藥篩選
    • 細胞毒性試驗
    • 細胞功能測試及篩選
    • Necrosis、apoptosis、 autophagy 、cancer 標記篩選
    • 訊號傳遞路徑的研究及分析
drug treatment
culture
Color reduction
Data analysis

ELISA assay

  • Enzyme-linked immunoassay，酵素免疫分析法
  • 抗原抗體間專一性鍵結的特性，進行檢測。
  • 主要三種檢測方法：
    • 三明治法(sandwich)：專一性高、不適 用於小分子抗原
    • 間接法(indirect)
    • 競爭法(competitive)：檢測小分子 抗原
  • 應用：
    • 檢體內特定蛋白質檢測及定量
    • 訊號傳遞路徑研究及分析
    • 生物標記的發現及驗證
Sample extract
ELISA
data analysis

Western blot

  • 利用抗原抗體間專一性鍵結的特性進行偵測，與ELISA原理 相同。
  • 準確度較ELISA高，可用於確定ELISA的結果。
  • 應用：
    • 檢測疾病
    • 檢體內特定蛋白質檢測及定量
    • 訊號傳遞路徑研究及分析
    • 生物標記的發現及驗證
separation gel
transfer
blotting
detection
data analysis